介绍

肌钙蛋白复合物是一种结合于细肌丝的异聚蛋白，肌钙蛋白I是其中一个亚基。在心肌和骨骼肌的收缩过程中，肌钙蛋白扮演了重要的角色。肌钙蛋白复合物由三个亚基所组成，分别是肌钙蛋白T（TnT）、肌钙蛋白I（TnI）和肌钙蛋白C（TnC），三个亚基通过非共价相互作用结合在一起。其中，肌钙蛋白T作为原肌球蛋白的铆钉亚基，参与调节肌钙蛋白复合物与细肌丝的相互组用。在低钙离子浓度条件下，肌钙蛋白I负责抑制肌动蛋白的形成。肌钙蛋白C作为钙离子结合亚基，参与肌肉刺激并改变肌钙蛋白复合物的形成，因此可以使肌动蛋白复合物形成进而参与肌肉收缩。

在人体中，TnI和TnT均存在三种亚型。其中，骨骼肌肌钙蛋白（skTnI和skTnT）分别包含快型骨骼肌肌钙蛋白I和T及慢型骨骼肌肌钙蛋白I和T；第三种则是心肌肌钙蛋白I（cTnI）和心肌肌钙蛋白T（cTnT）。cTnI仅在心肌组织中表达，而cTnT特异性略低，会在某些病变的骨骼肌中瞬时表达。

在20世纪80年代末期，cTnI和cTnT相继被建议作为心肌细胞死亡的标志物。如今，这两种标志物均作为指南推荐的标志物用于辅助诊断急性心肌梗死（AMI）、术后心肌创伤和化疗心脏毒性等临床病理学心肌损伤，以及其他疾病相关的心肌损伤。

超敏心肌肌钙蛋白概念

在20世纪90年代末期，当时的cTnI和cTnT试剂可以检出患者体内ng/mL(μg/L)级的肌钙蛋白。这种灵敏度水平的试剂仅能在缺血症状如胸痛发作3-6小时后可靠地检测到肌钙蛋白。这使得肌钙蛋白只能作为AMI的晚期标志物。而现在超敏肌钙蛋白检测系统的灵敏度可以达到pg /mL（ng/L），能检出任何形式的心肌损伤，包括发病1-3小时的AMI患者，节省的3小时黄金时间更有利于迅速进行患者管理。超敏肌钙蛋白检测使得肌钙蛋白成为AMI的早期标志物。

心肌肌钙蛋白I

HyTest的科学家对cTnI抗体的研究已经超过了20年，期间开发分析了数千株cTnI特异性抗体，仅选取最好的抗体上市销售。

心肌肌钙蛋白检测的影响因素

心肌肌钙蛋白I是一种极具挑战的分析物，其生化特征极为复杂。我们对cTnI研究多年已经深入理解其生化特征及翻译后修饰。这些研究成果使得我们可以更深刻地理解开发灵敏准确的cTnI检测分析系统对抗体性能的要求。

尽管cTnI被认为是心肌损伤诊断的金标准，但是至今cTnI检测仍然没有实现标准化。因此，当使用不同分析系统对同一份血样进行cTnI测定时，结果往往迥异。

造成这种差异的主要原因可以归结为不同试剂之间所使用的抗体的抗原表位不同。影响cTnI检测的干扰因素主要包括：蛋白水解、cTnI与其他蛋白结合、肝素影响、cTnI特异性自身抗体以及异嗜性抗体等。试剂中使用的单抗或多抗不同程度地受上述因素的影响。

cTnI免疫检测分析系统的开发及推荐配对

检测复合物形式的cTnI检测系统包括HyTest科学家在内的很多专家已证实，cTnI在血液中主要的存在形式是复合物形式，不存在游离的cTnI。因此，可使用识别cTn复合物的抗体配对检测cTnI。

在cTnI检测系统中使用TnC抗体

在检测系统中使用1株TnC特异性抗体和1株cTnI特异性抗体进行配对。TnC不会受到磷酸化影响，不易发生蛋白水解，对样本中的自身抗体和肝素也不敏感。这些特性均有助于提升检测系统的分析灵敏度、精密度和可重复性。我们提供两株TnC特异性抗体（货号4T27和4T27cc）。

在cTnI检测系统中使用cTn复合物抗体

在检测系统中使用1株cTn复合物特异性抗体和1株cTnI或TnC特异性抗体进行配对。我们提供两株cTn复合物特异性抗体（货号4TC2）。根据客户反馈，该模式已经在侧向层析平台中被广泛应用。

新一代心肌肌钙蛋白I24-40表位重组兔单克隆抗体

针对cTnI的24-40 a.a.r，我们开发了4株兔单抗(RecR1、 RecR23、 RecR33和 RecR85，货号：RC4T21)。这些单抗与识别cTnI其他表位的抗体进行配对用于夹心免疫系统，展示出了极高的灵敏度(LoD低于2ng/L)。

对于超敏肌钙蛋白试剂而言， 抗体的特异性对检测结果至关重要，我们将新开发的24-40 a.a.r抗体与其他抗体进行了配对并考察了其与骨骼肌肌钙蛋白I的交叉反应。结果显示，在干扰物浓度高达1000μg/L的情况下，所有配对与其均无交叉反应。

同时，我们将若干配对与贝克曼和雅培商品化试剂盒进行了临床样本比对，结果显示HyTest提供的推荐配对与雅培和贝克曼试剂之间均具有很好的相关性。

针对HAMA等异嗜性抗体的干扰，HyTest提供若干株人源化嵌合抗体。通过基因重组技术，我们将原有抗体的Fc片段替换为人源化Fc片段，可有效降低HAMA所导致的干扰。于此同时，我们还发现，通过使用嵌合抗体可进一步提高反应信号（20%-50%），且对于样本的检测结果无任何影响。

心肌肌钙蛋白T

用于超敏cTnT的单克隆抗体

我们提供的三株cTnT单抗（300cc、329cc和406cc，货号：4T19cc）可以用于开发超敏高特异性的cTnT免疫检测分析系统（最低检出限LoD值≤0.3ng/L，与cTnI和高达30μg/L的骨骼肌TnT无交叉反应）。同时，我们还提供单抗406cc的重组嵌合抗体，该嵌合抗体由人IgG1的Fc片段和野生原始克隆的Fab片段组成（ 货号： RC4T19， 克隆RecChim406）。我们的内部评测数据显示，RecChim406的灵敏度会略高于406cc。

我们用超过80例AMI患者血清和血浆样本对抗体配对329cc-406cc和406cc-300cc进行了验证。结果显示，该两组配对均与商品化cTnT试剂盒存在良好的相关性。